Analysieren von Viruspartikeln in Lösung

Herkömmliche visuelle Methoden zur Beobachtung von Viruspartikeln in Lösung ergeben eine Momentaufnahme von nur einem sehr kleinen und potenziell nicht repräsentativen Probenvolumen. Im Vergleich dazu liefert die Technik der Partikelanalyse mittels dynamischer Lichtstreuung einen Ensemblemittelwert der in diesen Lösungen vorhandenen Partikel. Die im Bericht vorgestellten Daten stammen aus DLS-Messungen, die mit einem NanoBrook ZetaPALS-Gerät durchgeführt wurden, das mit einem BI-MAS-Zubehörteil zur Partikelgrößenbestimmung ausgestattet ist.

Die Autoren erörtern, wie die Analyse von Viruspartikeln, die im Labor inkubiert werden, eine Herausforderung darstellt, da sie innerhalb von Zellen in einem Medium gezüchtet werden müssen, das Albumin und andere kleine Proteine enthält, wie sie z.B. in der Lösung von fötalem Rinderserum (Fetal Bovine Serum, FBS) vorkommen. Wenn Viruspartikel aus den Zellen freigesetzt werden, sind die Zellfragmente groß und können durch Zentrifugation getrennt werden, aber die kleineren Proteine des Mediums können nicht entfernt werden. Durch sorgfältige Auswahl der Verteilungsparameter aus einem dynamischen Lichtstreuungsexperiment können die Größenverteilungen der Viruspartikel in Gegenwart viel kleinerer Proteine, die das Medium bilden, deutlich beobachtet werden.

Die im Anwendungsbericht vorgestellten Ergebnisse zeigen deutlich das Vorhandensein von Viruspartikeln mit den erwarteten durchschnittlichen Dimensionen, wenn sie durch eine intensitätsgewichtete Verteilung beobachtet werden. Die Abwesenheit dieser Partikel in der Zahlenverteilung zeigt jedoch, dass die Viruspartikel im Vergleich zu den Proteinen und anderen kleinen Molekülen in Zellwachstumsmedien in relativ geringer Zahl vorhanden sind.

Der Nanobrook ZetaPALS von Testa Analytical bietet eine Plattform für die Zetapotenzialbestimmung von Nanopartikeln und Kolloiden in Wasser mit Salzkonzentrationen von weniger als 75 Millimolarer Ionenstärke. Das Instrument ist so konzipiert, dass es die Unzulänglichkeiten anderer Zetapotenzial-Instrumente beseitigt.

Für eine Kopie des Anwendungsberichts besuchen Sie bitte https://testa-analytical.com/papers/paper24.html. Weitere Informationen über das NanoBrook ZetaPALS-Instrument finden Sie unter https://www.testa-analytical.com/zeta-potential-equipment.html oder kontaktieren Sie Testa Analytical Solutions unter +49-30-864-24076 / info@testa-analytical.com .